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CRISPR/Cas9基因编辑及应用--基础篇

CRISPR/Cas9基因编辑及应用--基础篇


课程背景:

CRISPR-Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。而根据这套防御系统开发出来的CRISPR-Cas9基因编辑技术,则可以以对靶向基因进行特定DNA序列的编辑和修饰。以CRISPR-Cas9系统为基础的基因编辑技术在一系列基础科研和基因治疗的应用领域都展现出极大的应用前景,例如血液病、肿瘤和其他遗传疾病。该技术成果已应用于人类细胞、斑马鱼、小鼠以及细菌等的基因组精确修饰。本次讲座将分为基础篇和实践篇,给大家介绍CRISPR-Cas9基因编辑系统的发现和应用,以及自己如何完成这个实验操作的具体流程和方案。希望通过这个交流平台,对该技术达到进一步的理解和熟悉,为大家从事的科研和医疗工作提供帮助。


讲师介绍:

中洪博元生物技术部总监袁博士:袁搏毕业于中科院,曾在新加坡国立大学工作了10年,主要研究方向为胚胎干细胞分离培养、细胞生长因子功能性研究、外泌体的提取、检测和电镜成像,非编码RNA(lncRNA和circRNA)作用机制分析,通过慢病毒感染完成宿主基因编辑(CRISPR/Cas9)。袁博士曾参与主持了新加坡三个国家级基金项目,共发表SCI论文20余篇。


课程安排:

带你走进CRISPR/Cas9 系统的世界

CRISPR/Cas9系统的改进

利用CRISPR/Cas9系统编辑基因的实验步骤

sgRNA设计的具体要求及设计实例

生成sgRNA的方法:体外合成和胞内合成

Cas9蛋白的产生

体外验证sgRNA的切割效率

CRISPR/Cas9元件的导入

T7E1 酶切确认是否有基因编辑效果(预实验)

对个体或细胞株进行基因测序

获得纯合突变体(动物)或细胞克隆

Cre-loxp 系统及Cre/loxP重组酶系统用于条件性敲除

基因编辑应用实例 :编辑乙肝病毒基因组、敲除T细胞中的PD-1基因、利用基因编辑实现基因组定点修复



密码zhbydwzm

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