动物造模 中国实验动物信息网 2022-09-05 2973

　　目的 建立淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV-CL13慢性感染小鼠模型,分析其作为B细胞受体高频突变研究模型的可能性。

　　方法 C57BL/6N小鼠经尾静脉途径接种2×106PFU剂量LCMV-CL13病毒,感染后第10、20、30、40、50、60、70天采集样品,通过qPCR检测组织病毒载量,流式检测分析外周血CD4+ T、CD8+ T、 CD19+B细胞及脾生发中心B细胞比例,免疫组库测序分析BCR V区基因丰度及突变率。

　　结果 在LCMV-CL13病毒感染小鼠体内检测到1×106copies/μL水平的病毒复制;在感染平台期,小鼠外周血CD4+T细胞比例逐渐升高(13.15%±0.72%),CD8+T细胞先降低(2.17% ± 0.40%)后逐渐恢复(6. 65% ± 0. 52%),CD19+B 细胞以及生发中心B细胞比例分别增加至(40.32%±0.46%)和(10.03%±0.60%);测序结果证明BCR重链V基因使用频率下降、突变率显著性升高(P<0.05)。

　　结论 成功建立 LCMV-CL13 慢性感染小鼠模型；此模型可用于 BCR 突变研究,为研究慢性病毒感染导致的B细胞高频突变奠定了基础。