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【动物造模】-加味丹参饮体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的实验研究

  目的:探讨加味丹参汤对体外培养的骨髓间充质干细胞(骨髓间充质干细胞BMSC)向心肌样细胞分化的影响。

  方法:通过粘附方法获得大鼠BMSC,并通过流式细胞仪检测细胞表面抗原。采用MTT法检测加味丹参汤对骨髓间充质干细胞的*大无毒浓度。由第三代细胞(正常对照组,加味丹参汤组,5-阿扎胞苷组,加味丹参汤+ 5-阿扎胞苷)诱导。 Western印迹检测组,细胞结合蛋白(desmin),α-肌球蛋白重链(α-MHC),每组的心肌肌钙蛋白T(cTnT)蛋白表达,RT-PCR方法检测GATA-4、缺口表达连接蛋白43(CX43)和Nkx2-5 mRNA。

  结果:大鼠BMSC表面CD90的阳性率高于95%,CD34和CD45的阳性率低于5%。 BMSC加味丹参饮料的*大无毒浓度为0.625g/L。与正常对照组相比,加味丹参汤,5-阿扎胞苷组和加味丹参汤+ 5-阿扎胞苷组,GATA-4、CX43的结蛋白,α-MHC和cTnT蛋白的表达上调。并且Nkx2-5 mRNA表达水平上调,且差异具有统计学意义(P\u003c0.01)。与加味丹参汤组或5-阿扎胞苷组相比,加味丹参汤+ 5-阿扎胞苷组和GATA-4、CX43表达水平上调了Desmin,α-MHC和cTnT蛋白的表达。kx2-5 mRNA已上调。差异具有统计学意义(P\u003c0.01)。

  结论:加味丹参汤可将骨髓间充质干细胞转化为心肌细胞样细胞,与5-阿扎胞苷具有协同作用。

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