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如何建立椎间盘髓核细胞体外凋亡模型?-【动物造模】

  目的:建立大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型

  方法:为了充分模拟退行性椎间盘营养缺乏的微环境,本实验使用了含1%,3%,5%,8%和10%胎牛血清的DMEM培养基,并培养了椎间盘髓核细胞。筛选*高促凋亡浓度用于检测髓核细胞的凋亡率,凋亡相关蛋白Bax,bcl-2和caspase-3酶的表达,细胞增殖曲线以及免疫荧光分析。

  结果:流式细胞术测量的髓核细胞凋亡率随着胎牛血清(FBS)浓度的降低而增加,而3%FBS是诱导凋亡的*有效浓度。蛋白质印迹显示Bax和caspase表达。在-3酶3%FBS组中,bcl-2表达明显高于10%FBS组,并且bcl-2表达降低。 CCK-8研究的结果表明,在含有3%的培养基中,FBS随着凋亡率的增加而增加髓核细胞的增殖率。它的速度较慢,免疫荧光分析显示3%FBS组的FAS表达明显高于10%FBS组。

  结论:3%FBS诱导髓核细胞凋亡,*终可能导致细胞功能丧失。

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