动物造模,多瘤病毒,荧光PCR检测 中国实验动物信息网 2021-12-23 1285

　　目的：建立多瘤病毒荧光定量PCR检测方法，并研究裸鼠的多瘤病毒感染情况。

　　方法：将小鼠多瘤病毒（Genbank：NC_001515）的核苷酸序列与NCBI进行比较，选择贮藏区，设计引物和探针，建立多瘤病毒的荧光定量PCR方法，并验证方法的敏感性，并验证其特异性。 9只1天大的KM哺乳期小鼠被人工感染。 21天后，收集心脏，肝脏，脾脏，肺，肾脏，脑，胸腺，盲肠内容物和血液等组织器官，验证建立的荧光PCR方法，用于检测62份盲肠内容物样品裸肝大鼠。

　　结果：已建立的检测方法是高度特异性的，当以多瘤病毒为模板时，会出现清晰的荧光信号。当使用猴液泡病毒，小鼠K病毒，小鼠细小病毒，大鼠细小病毒H-1株作为模板时，没有荧光信号。此方法的*低检测限为100拷贝/μL。在人工感染的小鼠的心脏，肝脏，脾脏，肺脏，肾脏和盲肠的内容物中检测到多瘤病毒核酸。在大脑，胸腺和血液中检测到*高含量。裸mole鼠大鼠的盲肠内含物的62个样本均为多瘤病毒阴性。

　　结论：建立的多瘤病毒荧光定量PCR方法可以有效地检测动物组织中的多瘤病毒。自然感染多瘤病毒的裸mole鼠的研究可作为制定实验裸mole鼠微生物标准的参考。