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如何制备兔抗狨猴IgG⁃HRP标记抗体?-【动物造模】

  目的:从Mar猴血清中纯化IgG抗体,制备兔抗Mar猴抗血清,并用抗血清,HRP(辣根过氧化物酶)标记的兔抗Mar猴IgG进行纯化。

  方法:HiTrapTM蛋白G亲和层析纯化mar猴和兔抗mar猴血清IgG,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS?PAGE)用于纯度鉴定,免疫琼脂双扩散法(双重免疫)兔抗兔抗-猴IgG ?使用改良的“简单高碘酸钠标记方法”,该方法制备了mo猴抗血清滴度。制备了HRP标记的抗体。酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹(Western blotting)兔抗-猴IgG? HRP标记的抗体用于确定工作浓度并进行特异性鉴定。

  结果:来自mar猴和兔抗mar猴血清的纯化的IgG分别具有超过95%和97%的纯度,并且兔抗mar猴IgG抗血清滴度为1:64、 ELISA和Western印迹检测兔抗mar猴IgG吗?在参考工作浓度为1:256,000和1:15,000时,以明确的特异性鉴定出HRP酶标记的抗体。

  结论:Marmoset IgG是否包含ELISA的特异性和浓度以及Western blotting? HRP标记抗体的制备和预鉴定为mar病原体的免疫学和分子免疫学检测系统保留了资源。

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