动物造模,小鼠脑脊髓炎病毒 中国实验动物信息网 2021-10-08 1464

　　目的：建立小鼠脑脊髓炎病毒RT-PCR方法并初步应用。

　　方法：根据NCBI公布的TMEVGDVII毒株（GI：62039）基因组序列设计特异性引物，建立RT-PCR方法，验证方法的灵敏度和特异性，并检查脑腔接种方法9 BALB/c 小鼠与样品 第 6 天后，取动物脑、心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、阑尾炎内容物和血清样品，并使用建立的方法。同时，100 个样品检测小鼠阑尾炎内容物，并初步应用该方法。

　　结果：以GDVIINA为模板，建立的RT-PCR方法可扩增出一条约371 bp的单条带，灵敏度验证显示，可检出的GDVII cDNA*小量为0.69 pg/μL。说明有是。并以淋巴细胞脉络膜脑膜炎病毒、日本脑炎病毒、鼠诺如病毒和正常小鼠脑组织作为对照进行方法特异性验证，未出现目标条带。将感染小鼠接种到脑腔后，所有小鼠在接种第3天出现不同程度的不适和后肢麻痹，第5天有2只小鼠死亡（心、肝、脾、肺、肾、脑）。 100 只小鼠脑组织中检测到 GDVIINA，但未检测到其他组织。检测 100 只小鼠的盲肠内容物，结果均为阴性。

　　结论：TMEVGDVII 株 建立的T-PCR 方法可以有效检测病毒小鼠组织感染，可作为实验动物国家标准的有力补充。