动物造模 中国实验动物信息网 2021-12-07 1619

　　目的：观察RNA干扰技术阻断局部血管紧张素II 1型受体（AT1R）表达后db/db小鼠胰岛1期胰岛素分泌的变化，并探讨其潜在机制。

　　方法：分离db/db和db/m小鼠胰岛，检测AT1R mRNA和蛋白表达。构建靶向小鼠 AT1R 基因的NA 干扰重组腺病毒 (Ad-siAT1R) 和含有调控序列的重组腺病毒 (Ad-siControl)。将分离培养的db/db小鼠胰岛细胞分为三组：Ad-siAT1R感染组、Ad-siControl感染组和空白对照组。腺病毒感染后培养胰岛细胞72小时。检测各组AT1R、GLUT-2和葡萄糖激酶（GCK）的表达，并使用胰岛灌注系统检测动态胰岛素分泌。

　　结果：db/db小鼠胰岛AT1R mRNA和蛋白的表达水平约为db/m小鼠胰岛的两倍（Pu003c0.05）。腺病毒感染后，与Ad-siControl组相比，Ad-siAT1R组胰岛AT1R mRNA表达水平降低75?蛋白表达水平降低65?而GLUT-2和GCK分别为190?并增加了121?均Pu003c0.05）。在空白对照组和 Ad-si 对照组中胰岛灌注显示胰岛素分泌的*阶段显着减少。这仅为基础水平的 1.8 倍，但 Ad-si AT1R 组达到了 140 mU/1-2 分钟的峰值。高糖负荷后。 L为基础水平的2.8倍，说明*阶段胰岛素分泌有明显改善。

　　结论：RNA干扰可以特异性阻断胰岛局部AT1R表达，上调GLUT-2和GCK表达，恢复1相胰岛素分泌。这可能是 AT1R 阻滞剂改善的机制之一。