动物造模 中国实验动物信息网 2021-09-03 1979

　　目的    构建免疫系统人源化的小鼠模型，并移植入人前列腺癌细胞系，以期用于前列腺癌免疫治疗药物研究。

　　方法    利用Ficoll密度梯度离心法，从新鲜的人外周血中分离出单个核细胞（peripheral bod mononucear cell，PBMC），经尾静脉注射 NPG小鼠，构建具有人免疫系统的小鼠模型。注射后第3、4、5、6周分别采用断尾法采集小鼠外周血，并用流式细胞仪监测小鼠外周血中人CD45＋+CD3+T细胞的动态变化水平。在注射后第3周给予小鼠皮下移植1×10'个前列腺癌2R1细胞，每周两次监测肿瘤生长情况。当肿瘤生长至1000 mm²左右，对小鼠施行安乐死;利用流式细胞术、免疫组化、HE染色等方法分析人源化小鼠外周血、脾及肿瘤组织中人免疫细胞的浸润情况。

　　结果    模型小鼠在移植人PBMC后3~6周期间，外周血中检测到较高水平的CD45＋CD3+T细胞。第6周时处死小鼠，HE染色和免疫组化染色结果表明，模型小鼠的脾和肿瘤组织中具有人CD4+、CD8+T细胞的浸润。

　　结论    成功构建了前列腺癌免疫人源化小鼠模型，其外周血、脾及前列腺癌肿瘤组织中均有高水平的人源性T细胞浸润，为下一步构建良好的前列腺癌免疫治疗临床前模型奠定了基础。