动物造模,甲型H1N1流感病毒 中国实验动物信息网 2021-10-20 1991

　　目的 比较甲型 H1N1 流感病毒 PR8 毒株感染老年和年轻 C57BL/ 6 小鼠诱导肺组织 CD8+ T 细胞特异性免疫应答的能力。

　　方法 使用 490 PFU 的 PR8 病毒分别滴鼻感染年轻(3 月龄)和老年(24 月龄)C57BL/ 6 小鼠,连续 14 d 每日记录其体重变化及死亡情况。 在感染后第 8 天分离小鼠肺组织细胞,使用流式细胞术 (fluorescence-activated cell sorting,FACS)技术检测病毒抗原特异性 CD8+ T 细胞数量及功能:MHC-I 表位肽四聚体法(tetramer staining)染色流感特异性 CD8+T 细胞,细胞内细胞因子染色法( intracellular cytokine staining,ICS)检测 CD8+T 细胞经流感病毒特异性肽刺激后分泌细胞因子水平包括 TNF-α、IFN-γ、IL-2 以及与 CD8+ T 细胞杀伤功能有关的颗粒酶 B(Granzyme B)的水平。

　　结果 相同量的 PR8 流感病毒感染小鼠后,老年小鼠体重下降更多,死亡率显著高于年轻小鼠(P < 0. 01)。 另一方面,老年组小鼠诱生的病毒特异性 CD8+T 细胞比例显著低于年轻组;同时, 老年组 CD8+T 细胞活化后分泌细胞因子 TNF-α、IFN-γ、IL-2 的水平显著低于年轻组;此外,老年组 CD8+T 细胞表达 granzyme B 的水平同样显著低于年轻组。

　　结论 PR8 流感病毒感染老年和年轻 C57BL/ 6 小鼠后,老年小鼠肺组织诱导产生的特异性 CD8+T 细胞的数量减少且功能降低。 结果表明:与年轻小鼠相比,老年小鼠肺组织 CD8+ T 细胞特异性免疫应答功能受损。