动物造模,实验动物,PCR 中国实验动物信息网 2022-03-12 1457

　　目的： 建立快速检测多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的多重PCR方法。

　　方法： 根据GenBank基因设计出特异性引物；经过多重PCR的优化，特异性和敏感性的检测，建立多重PCR体系。应用该PCR体系检测人工感染样本和实验动物的气管分泌物，并与传统方法做对比。

　　结果： 多重PCR扩增出多杀巴氏杆菌（356 bp）、支气管鲍特杆菌（237 bp）、支原体（266 bp）和肺炎克雷伯杆菌（142 bp）的目的条带。肺炎克雷伯杆菌敏感性为10 pg，多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体敏感性为1 pg，特异性检测未从其他病原菌中检测出目的条带。应用建立的多重PCR体系检测人工感染样本的不同组合，45只实验动物气管检测出15只多杀巴氏杆菌阳性，9只肺支原体阳性，但传统培养方法和血清学方法未检测出阳性标本。

　　结论： 本文建立的多重PCR方法操作简单、快速、特异性强、灵敏度高，能够实现对多杀巴氏杆菌、支气管鲍特杆菌、支原体和肺炎克雷伯杆菌4种实验动物病原体的快速检测。