动物造模 中国实验动物信息网 2022-05-07 1425

　　目的 建立鼠痘病毒（ECTV）的TaqMan 探针法荧光定量 PCR 检测方法，并对实验室保存的裸鼹鼠组织样本、小鼠组织样本以及黄鼠组织样本进行检测。

　　方法 根据GenBank 中鼠痘病毒的 crnD 基因序列设计引物探针，建立 ECTV的FQ-PCR 检测方法，对保存的样本进行筛查，并对部分阳性样本进行测序鉴定。

　　结果 建立的 ECTV FQ-PCR 检测方法灵敏度高、特异性强，*低能检测到 ECTV 核酸浓度为 10 copies/μ. 的样本，方法的标准曲线相关参数符合标准。使用该方法检测实验室 63 份裸鼹鼠脾组织样本和2 份小鼠脾组织样本，结果全为阴性，检测4只黄鼠组织样本，结果阳性率为 50%。阳性样本进行 PCR检测后测序比对为 ECTV 核酸序列。

　　结论  经验证，建立的 ECTV FO-PCR 检测方法能够灵敏特异的对样本中的 ECTV 进行筛查，实验室小鼠的日常监测不应忽视 ECTV 污染的潜在风险。