RT-qPCR检测 中国实验动物信息网 2020-12-10 960

　　目的 建立实时荧光定量（RT-qPCR）检测Wistar大鼠黄嘌呤股氢酶/氧化酶（XDH/XO）基因转录水平的方法，以在转录水平上对XDH/XO基因进行定量检测。

　　方法 提取Wistar大鼠肝脏组织中总RNA，经逆转录得到cDNA，以10倍为稀释因子稀释为5个浓度梯度，使用设计的引物序列和内参基因进行RT-qPCR检测，得到XDH/XO基因表达的标准曲线。进而检测Wistar大鼠高尿酸血症动物模型中XDH/XO基因转录水平的变化。

　　结果 RT-pPCR法检测得到的XDH/XO基因标准曲线溶解峰单一，R2接近1，能检测出高尿酸动物模型中XDH/XO 基因转录水平的变化。

　　结论 RT-qPCR检测Wisar大鼠XDH/XO基因转录水平的方法具有定量准确，重复性好的特点，可应用于高尿酸血症的发病机理、新药研究等方面。