脊髓损伤,动物造模 中国实验动物信息网 2023-03-20 513

　　目的 探讨 MST1 / 2 抑制剂对大鼠脊髓损伤后 Yes 相关蛋白 YAP、神经生长相关蛋白 43、神经胶质 纤维蛋白 GFAP、细胞凋亡因子 Caspase3 表达及运动功能恢复的影响。

　　方法 选取 105 只体重 180 ~ 200 g 成年雌 性 SD 大鼠,对 35 只仅做椎板切除手术且不注射药物为假手术组,对 70 只大鼠建立脊髓顿挫损伤模型,分为生理 盐水组、MST1 / 2 抑制剂组,腹腔注射生理盐水、1 mg / kg XMU-MP-1。 在手术后第 1、3、7、14、21、28 天,进行斜板实 验及 BBB 运动功能评分,然后处死大鼠收集脊髓损伤区周围组织,进行免疫荧光染色和免疫印迹检测,观察各组大 鼠脊髓组织中 YAP、GAP43、Caspase3、GFAP 表达变化情况。

　　结果 斜板实验与 BBB 运动功能评分结果显示,从术 后第 7 天起,MST1 / 2 抑制剂组评分明显高于生理盐水组,一直持续到术后第 28 天,差异有统计学意义( P < 0. 05)。 免疫印记结果显示,术后第 14 天 MST1 / 2 抑制剂组的 YAP 表达明显高于生理盐水组,差异有统计学意义 (P < 0. 05);术后第 14 天 MST1 / 2 抑制剂组 GFAP、Caspase3 表达明显低于生理盐水组,同时发现 GAP43 出现表 达,差异有统计学意义(P < 0. 05)。 荧光染色显示,MST1 / 2 抑制剂组较少炎症细胞浸润、形成神经组织结构框架, 生理盐水组明显炎症细胞浸润、形成大量神经胶质瘢痕。 免疫荧光染色结果显示,假手术组 YAP 在神经细胞中出 现表达,生理盐水组和 MST1 / 2 抑制剂组 YAP 在神经胶质细胞出现表达,且 MST1 / 2 抑制剂组 YAP、GAP43 阳性细 胞数量明显高于其他两组,MST1 / 2 抑制剂组成熟肥大的星形胶质细胞数量明显少于生理盐水组;免疫荧光双标结 果显示,YAP 与 GFAP 出现共同表达。

　　结论 脊髓损伤后大剂量应用 MST1 / 2 抑制剂能明显促进 YAP 表达,减轻 炎症损伤反应,抑制神经细胞凋亡,改善脊髓损伤区微环境,促进星形胶质细胞形成原始神经组织结构框架,有利 于神经突起再生修复,促进运动功能恢复。