动物造模,狼疮小鼠模型 中国实验动物信息网 2021-10-19 1777

　　（1）生殖方法（雌性DBA/2 x雄性C57BL/6J）将重约16 g，6至8周大的F1代小鼠注射到母小鼠的DBA/2淋巴细胞中，并通过尾部静脉内注射指导模型。 12周首先，麻醉DBA/2小鼠，并以3：2：1的比例无菌分离脾脏，胸腺和淋巴结。将组织在生理盐水中研磨，并通过150μm和70μm尼龙筛。在显微镜下观察细胞的活力并计数细胞数量。将制备的活淋巴细胞通过F1代小鼠的尾静脉注射入体内。每只小鼠的注射体积为50 x 1000000活淋巴细胞。注射时间分别为0、3、7和10天，观察时间为12周。在实验的预定时间收集模型小鼠的尿液以测量尿蛋白浓度，并使用血液测量血清肌酐（SCr），尿素氮（BUN），胆固醇（TC）和甘油三酸酯（TG）。在。 ），白蛋白（ALB）等指示剂和间接免疫荧光检测自身抗体dsDNA并在荧光显微镜下观察。取模型小鼠的肾脏，用电子显微镜准备冷冻切片，常规石蜡切片和超薄切片，然后用光学显微镜和透射电子显微镜观察它们。

　　（2）模型特征模型小鼠的活性从注射活淋巴细胞后的第4周开始下降，从第8周开始体重开始增加，头发略微发黑。小鼠有皮下水肿，有些动物有腹水。有些老鼠会抽搐。注射后十周，模型小鼠的腹部明显肿大，移动缓慢且呆滞。确保用肉眼在腹部有大量清晰的腹水，脾脏和肾脏明显肿大，肾脏变薄。分离的血清为开罗样，小鼠模型率为96％，所有未建模的小鼠均为雄性。 F1代小鼠在注射母鼠淋巴细胞2周后产生了自身抗体和蛋白尿，F1代小鼠在显微镜下观察到的4周时血脂，血清肌酐和尿素氮略有增加，下面仅是肾脏的内部系膜组织可见。细胞略有增生，无间质性损伤；在第8周，小鼠血液生化指标发生了显着变化，白蛋白和总蛋白增加，而在12周后，白蛋白和总蛋白减少了。在显微镜下观察肾小球系膜细胞增生，炎性细胞基质浸润和大量蛋白尿进入肾小管；在第12周，肾小球系膜显示中度至重度增殖，肾小球混乱，类似于人VI型狼疮性肾炎，其中大量在内皮下发现了许多免疫复合物，局部或弥漫性肾脏很小。在10-12周的过程中，各种观察指标发生了显着变化。免疫荧光显示IgG，IgM和C3沿毛细血管壁和系膜区沉积。用这种方法建立的狼疮小鼠模型易于创建，发展迅速，具有典型的病理特征，模型率高。

　　（3）比较医学系统性红斑狼疮（SLE）是一种严重危害人类健康的自身免疫性疾病。其病因尚未阐明。选择合适的理想动物，以进一步探讨其病因和预防措施。这很重要。自发性狼疮小鼠模型（例如NZB/NZW，MRL和BXSB）已在以前的研究报告中广泛使用。尽管这些小鼠可以独立地发展和发展SLE，但它们具有耗时且难以控制的缺点。使用影响这些条件的实验条件模型的价值。慢性移植物抗宿主病（CgVHD）狼疮样小鼠模型是国际公认的狼疮小鼠模型，可以通过实验方法诱发，实验条件易于控制，发病较早，诱导后12周，可能出现狼疮性肾炎的典型病理变化，该病理变化与人性狼疮性肾炎和狼疮性肾炎的典型症状相似，特别适合研究。慢性移植物抗宿主病（cGVHD）小鼠模型的病因学以淋巴成形术为特征，淋巴成形术可能产生与临床SLE患者相似的自身抗体，以及严重的免疫复合物介导的肾脏疾病。该模型的病因是通过将亲代淋巴细胞移植到F1代小鼠中诱导的，其病因是MHC部分不相容。该模型中雌性DBA/2的基因型为H-2d，亲本小鼠（如C57BL/6或C57BL/10）的基因型为H-2b，交配后获得的F1代小鼠的基因型为H-2b。 H.-2d/b，MHC类的部分相同。供体DBA/2小鼠缺乏与抗F1代小鼠T细胞同种的细胞毒性CD8 + T细胞，因此MHC型CD8 + T细胞是无活性的，在体内具有INF-γ含量，并伴有CTL的降低和CTL的降低。细胞；体内抗同种异体MHC-IICD4 + T细胞激活受体B细胞，从而在F1代小鼠中引起B细胞增殖，从而产生自身抗体，并*终导致SLE样表达。通过这种方法建立的慢性移植物抗宿主疾病的狼疮样小鼠模型类似于临床人狼疮肾炎，并且是理想的狼疮肾炎模型。