动物造模,SARS感染 中国实验动物信息网 2022-02-04 658

　　（1）繁殖方法对3至6岁的健康恒河猴（Rhesus macaques）和食蟹猴（M.fascicularis）肌肉注射0.15 ml/kg体重的快速睡眠，然后在鼻内和气管内重新麻醉。感染SARS-CoVBJ01株（10至5.7 TCID50/ml）。在攻击后第2、5和7天从模型动物的咽拭子中分离出病毒，免疫荧光鉴定该病毒为SARS病毒。一些被感染的猴子有出血区域或在肺部。所有感染的猴子都可以发展出严重程度不同的多灶性单核间质性肺炎，表现为肺泡间隔增大，出血和渗出。肺泡腔和小支气管内的肺泡上皮细胞和巨噬细胞脱落，细支气管上皮细胞也流失，在某些肺泡腔中出现少量淋巴细胞为主的炎症细胞浸润。 ，有时在肺泡腔内可见玻璃膜形成。免疫组织化学可以检测肺泡巨噬细胞和I型上皮细胞上的SARS病毒抗原。在对受感染动物进行尸检时，在支气管淋巴结和心肌中检测到病毒RNA，并伴有炎症变化。大多数模型动物患肝炎的主要原因是多灶性淋巴细胞感染并伴有个别肝细胞坏死。

　　（2）模型特征感染后，模型动物表现出病理变化。肺部是病毒感染的主要目标器官。在每个肺叶中可见弥漫性肺泡损伤，形成透明膜并显示单核细胞浸润。可以通过病毒学检验和免疫学方法在模型动物的血液，咽拭子，肺泡上皮细胞和支气管淋巴结等组织样本中检测出SARS病毒RNA，并且该病毒可以在非灵长类动物中复制显示。细胞免疫反应。从感染的第3天开始，某些感染猴子的白细胞和血小板计数暂时降低，然后逐渐恢复到正常水平。动物在感染后第2、3和4周产生针对SARS病毒的特异性抗体。血清中针对SARS-CoV的特异性抗体水平相对较高。恒河猴可以用作SARS病毒感染的动物模型，并被证明适合研究SARS的病因，药物筛选和疫苗评估。

　　（3）比较医学所有感染的猴子都没有观察到SARS的典型临床表现，包括高烧，干咳，嗜睡，短暂性皮疹和呼吸困难。所有食蟹猴的体温都在正常范围内波动。然而，感染的猴子肺组织的病理变化，如弥漫性肺泡损伤和单核细胞浸润，与SARS冠状病毒感染后的人肺组织基本相似，且病理变化为比人类温柔。感染后在模型动物中产生SARS特异性抗体。感染后约4周，血清中的抗体水平升高，与人类SARS患者的相似。 SA S患者中产生的特异性IgM抗体从第7天开始出现，峰值可达到11天； IgG抗体在10天后产生，并在20天达到峰值；同时，该病毒是从受感染的猴子的组织和分泌物中分离出来的。换句话说，感染SARS病毒的恒河猴的病理变化与感染SARS病毒的人类的病理变化非常相似，因为非人类灵长类动物的遗传背景与人类相似。 ，成为理想的SARS动物模型。但是，由于受客观条件的限制，猴子无法用于大型研究。此限制降低了该模型应用程序的价值。