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【动物造模-药效评价】-反复免疫诱发大鼠溃疡性结肠炎

  1.造模材料  动物:成年大鼠,雌雄不限,体重250~400g;药物:生理盐水,甲醛。

  2.造模方法  取一只健康大鼠的结肠内容物,划线于伊红美蓝平板,37℃培养24h,取典型菌落扩增,并作数值鉴定,确定为大肠埃希菌后,冰箱保存备用。免疫前先取菌种扩增后,再用甲醛杀死细菌,用生理盐水洗2次并将浓度调为1.2×10的8次方/ml,在第1天于大鼠足跖注射细菌悬液0.2ml,10天、17天再分别于腹部和背部皮下多点注射0.4ml和0.6ml,24天腹腔内注射1.2ml。

  3.造模原理  以大鼠正常菌群为抗原,随着免疫次数的增多,引起大鼠产生免疫反应。

  4.造模后变化  随着免疫次数的增加,大鼠结肠壁逐渐出现溃疡和弥散性炎症,同时出现细胞免疫力下降和循环免疫复合物增加。免疫2周出现软便、大便潜血阳性,3周出现黏液便,伴食欲减退、消瘦、倦怠、毛松等症状,31天后可见典型溃疡性结肠炎表现,并逐渐加重,组织病理学检查符合溃疡性结肠炎条件。

  5.注意事项  本模型的技术关键是需要一定设施和技术进行大肠埃希菌混悬液的制备。本法实验操作简单,抗原来源方便,成功率高,产生的症状与临床相似,但实验周期长。

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