动物模型,脑挫伤模型 中国实验动物信息网 2022-02-19 1812

　　1.实验的目的是使用SD大鼠作为实验动物，并使用自制的自由落体损伤装置进一步开发标准化且可重现的创伤性脑损伤（TBI）动物模型和行为评估系统。建立详细。研究脑挫裂伤的机制奠定基础。

　　2.实验原理

　　直接外力撞击大鼠的大脑皮层并损害大脑。

　　3.实验材料和方法

　　（1）实验材料

　　1.所需设备，自动灭菌锅（MLS-3020），电加热恒温鼓风干燥箱。

　　2.必要试剂水合水合氯醛粉，0.9％氯化钠溶液，医用碘消毒剂。

　　3.制备3.6％水合氯醛溶液的试剂：称取3.6 g水合氯醛粉末，溶于100 ml无菌0.9％氯化钠溶液中并充分混合。存放在室温下。

　　4.实验动物SD雄性大鼠，体重（160±10）g。

　　（II）实验特定的方法和操作程序

　　1. TBI模型的制备

　　（1）麻醉：腹膜内注射3.6％水合氯醛（1 ml/100 g）进行麻醉。

　　（2）皮肤准备：麻醉后，用电动剃须刀刮胡子。

　　（3）毛巾消毒：定期用医用碘消毒剂对头皮进行消毒，并铺上无菌的毛巾。

　　（4）暴露伤口：用解剖刀沿矢状缝合线切开皮肤，露出左顶骨，刮开骨膜，并将前Font骨和人字形十字形缝合到矢状缝合线的左侧。清楚地暴露后方Font门和矢状缝线，横向于前后方门the中点1mm，并用牙钻切开5mm直径的骨窗（避免对硬脑膜造成损害因为），请使用棉球止血。

　　（5）伤害：采用自由落体冲击伤害法创建了大鼠颅脑创伤模型，锤的重量为50 g，冲击高度为30 cm。撞锤下边缘与大鼠大脑之间的接触表面是直径为4毫米的球形表面。将老鼠放在自由落体受伤装置的底板上。老鼠的头部朝向自由落体伤害装置，尾部朝向操作者。用食指和拇指抓住老鼠的头，将其直接固定在撞杆下方。每次撞击之前，请用医用碘消毒剂对撞击杆进行消毒。下边缘位于头骨的左侧，在大鼠头骨窗口上方。 50克重的锤子会从30厘米处自由落到冲击棒上，从而损坏大脑。撞击后立即取下活塞杆。

　　（6）闭合切口：取下撞针后，再次用医用碘消毒剂对切口进行消毒并缝合头皮。

　　（7）术后处理：手术后，将大鼠放在培养箱旁边，保持体温在37°C，完全苏醒后回到笼中，然后抬高。每天向每只大鼠腹膜内注射氨苄西林（20 IU剂量），以防止感染3天。

　　2.行为评估在手术后1天，3天，5天，7天，9天，11天，13天采用NSS（神经功能障碍严重程度评分）标准（18分制）在15天内进行TBI模型大鼠的行为研究。分数越高，损害越严重。

　　（3）实验中的注意事项

　　（1）麻醉期间，针应从后肢内侧到上侧（头部）成45度角插入腹腔，并应感觉到明显的脱落感。我可以。离开针头1分钟，然后立即将其移开，以避免将药物注射到影响麻醉效果的后肢大腿肌肉中。

　　（2）打开骨窗以损坏矢状窦，引起大鼠失血性休克或增加实验大鼠的死亡率时，请小心谨慎地操作牙钻。请不要如果不小心伤害了矢状窦和出血，请立即停止手术，将棉球按在颅骨伤口上5-10分钟，并在止血后继续操作。

　　（3）移液器尖端可以放置在牙科钻头上，因此钻头仅将移液器尖端的尖端暴露2mm，因此，当骨钻打开窗口时，请加深钻头和脑您可以有效避免过度用力损坏皮质。第四、获得的实验结果（1）受伤后无动物死亡，术后生存率高。

　　（2）受伤后*天的NSS多数得分为7-9分，并且大多数在术后13-15天恢复到2-3分。

　　5.结果分析

　　（1）以这种方式创建的大鼠TBI模型高度可靠，并且动物死亡率极低。

　　（2）使用50g的重量和30cm的惊人高度会导致中度脑损伤和明显的神经损伤症状。

　　6.经验和经验

　　（1）开始实验之前的准备工作，例如准备实验动物，消毒手术器械，准备麻醉剂，准备抗生素等，非常重要。您只能在准备就绪时使用它。实验进行得很顺利。

　　（2）准备动物模型中*重要的步骤是钻一个骨窗。这与模型准备的成功与否直接相关。在打开骨窗期间，矢状窦的意外损坏会导致头部伤口流血过多。手术后24-48小时内动物很容易死亡。如果骨骼窗口太小，则撞击时撞击棒会卡在头骨上，而无法达到损坏皮质的目的。