动物造模 中国实验动物信息网 2021-10-11 893

　　目的：使用三七总皂甙（PNS）及其单体Rg1诱导的缺氧葡萄糖缺氧细胞损伤模型，以减轻缺氧引起的血管内皮紧密连接？研究Rb1的保护作用。

　　方法：将HUVEC细胞接种到transwell细胞室并融合细胞后，建立了一个实验组：正常对照组？模型组？ PNS10、20、40 mg/L组和Rb113.52 mg/L，Rg112.44 mg/L组在缺氧和葡萄糖缺乏6小时和复氧24小时后的缺氧期间同时进行药物干预，HUVEC检测到内皮细胞的变化阻力和内皮通透性。使用激光共聚焦显微镜和免疫荧光检测HUVEC细胞ZO-1βclaudin-5蛋白表达的变化。

　　结果：与正常对照组相比，低氧6小时和再氧24小时后，HUVEC细胞内皮细胞之间的紧密连接阻力显着降低，细胞通透性显着增加（P\u003c0.05）。 PNS20和40 mg/L组可显着抑制模型组紧密连接电阻的降低和HUVEC细胞通透性的提高（P\u003c0.05）。人参皂苷Rb1可能会在OGD6h复氧24小时后显着增加内皮的紧密连接阻力并降低HUVEC细胞通透性（P\u003c0.05）。免疫荧光检测结果表明，正常对照组HUVEC细胞的ZO-1和claudin-5蛋白主要分布在细胞膜周围并连续排列，这是内皮细胞的典型现象，显示出铺路石的排列。在缺氧6小时和复氧24小时后，模型组的细胞端紧密连接蛋白显着减少，环结构被破坏或消失，核紧密连接蛋白趋于增加。 PNS20、40 mg/L和Rb113.52 mg/L显示细胞之间紧密连接的局部恢复，并显示铺路石样结构。

　　结论：PNS对缺血引起的血管内皮细胞之间紧密连接的损伤具有保护作用。