动物造模,慢病毒载体介导HCV受体基因 中国实验动物信息网 2021-12-23 1073

　　目的：观察慢病毒载体转染HCV受体基因OCLN/CD81对体外培养条件下树骨髓间充质干细胞生物学特性和基因表达的影响？

　　方法：使用该腔室分离并保存的树木从BM-MSC中收获，构建包含人OCLN/CD81基因的慢病毒载体，并分别转染到BM-MSC，然后用荧光倒置显微镜和流式细胞仪检测转染效率。我使用了CCK8方法。您是否检测到转染后BM-MSC细胞的增殖，诱导成骨脂肪细胞分化以及检测多向分化潜能？实时荧光定量和WB法检测HCV受体（OC/CD81）基因的mRNA和蛋白质表达。转染后BM-MSC干细胞基因的表达是什么？

　　结果：用MOI100转染含有人OCLN/CD81基因的慢病毒载体后，LV-CD81的转染效率是否达到99.4％，LVOCLN的转染效率是否达到22.6％？细胞增殖趋势与未转染的BM-MSC相似，转染的BM-MSC仍可分化为成骨细胞，但其能力是否降低了？干基因NANOG mRNA表达增加，差异有统计学意义（P\u003c0.05），LIN28A mRNA表达降低，差异有显着性（P\u003c0.05）？转染后，树干细胞BM-MSC是否可以有效表达易位的外源基因？

　　结论：构建的基于人OCLN/CD81基因的慢病毒载体可以成功转染Tree Schrew BM-MSC，并有效表达转移的基因。转染后对Tree Schrew BM-MSC的多向分化潜力有一定影响吗？