目的:建立大鼠椎间盘髓核细胞体外凋亡模型。
方法:为充分模拟退行性椎间盘营养缺乏症的微环境,本实验使用含有1%,3%,5%,8%和10%胎牛血清的DMEM培养基,然后培养椎间盘髓核细胞。 屏幕*高促凋亡浓度用于检测髓核细胞的凋亡率,凋亡相关蛋白Bax,bcl-2和caspase-3的表达,细胞增殖曲线以及免疫荧光分析。
结果:流式细胞术测量的髓核细胞凋亡率随着胎牛血清(FBS)浓度的降低而增加,而3%FBS是诱导凋亡的*有效浓度。 Western印迹显示Bax和caspase-3的表达。 3%FBS组的酶明显高于10%FBS组,bcl-2表达降低。 CCK-8试验的结果表明,在含有3%FBS的培养基中,髓核细胞的增殖率随着凋亡率的增加而增加。 3%FBS组被延迟,FAS的表达明显高于10%FBS组。
结论:3%的FBS诱导髓核细胞凋亡,*终可能导致细胞功能丧失。