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【动物造模】-如何建立小鼠睾丸体外培养模型?

  目的:通过寻找合适的培养条件,建立小鼠睾丸器官培养模型

  方法:使用旋转曝气培养法体外培养睾丸,优化培养条件,并与Transwell细胞培养法进行形态学比较。 HE染色用于观察睾丸组织结构的变化,BrdU染色用于观察睾丸细胞的体外增殖,放射免疫法用于观察睾丸的睾丸体外分泌能力,并通过免疫组织化学观察睾丸。

  结果:通过比较培养结果,通过旋转通气培养方法培养的睾丸组织的形态变得更加完整。睾丸的大小为0.3-0.8 mm3、各组精原细胞增生指数均呈上升趋势,而支持细胞的增生指数呈下降趋势:3d组精原细胞增生指数的增加与1d组差异有统计学意义(P\u003c0 .05)),第5d组的Sertoli细胞增殖指数明显更高。与第1天组相比,下降幅度有统计学差异(P\u003c0.05)。睾丸激素的分泌随着培养天数的增加而减少,且差异具有统计学意义(P\u003c0.05)。培养3天后,在Leydig细胞的细胞质和支持细胞波形蛋白的细胞质中发现了3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD),细胞色素P45017α羟化酶(P450c17)和胆固醇侧链裂合酶(P450Scc)蛋白的表达。 (波形蛋白)表达被看到。

  结论:通过旋转通气培养成功建立了睾丸器官的体外培养模型。

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