动物造模,小鼠年龄相关性黄斑变性模型 中国实验动物信息网 2021-10-09 2191

　　目的：指导建立慢性光照和氢醌喂养相结合的小鼠年龄相关性黄斑变性模型，观察其病理特征、微观结构和视网膜功能的变化，为AMD的新发病机制和预防提供模型。

　　方法：20只4个月大的C57BL/6小鼠随机分为模型组和正常组，每组10只。模型组小鼠饲喂基于基础纯度合成的含 8 g/(kg? bw) 对苯二酚的饮食，并每天暴露在 2500 lx 强度的光下 12 小时。正常组小鼠在正常光照下饲喂相同的不含对苯二酚的配方饲料，饲养3.5个月。采用视网膜电图（ERG）、光学显微镜、电镜观察两组小鼠视网膜功能和结构的变化，TUNEL法观察视网膜细胞凋亡，免疫荧光法观察。检测视网膜和脉络膜血管内皮生长因子 (VEGF) 和 CD31、表达和分布。

　　结果：ERG检查结果显示，模型组视网膜功能低于正常组；光镜下模型组视网膜色素上皮和布鲁赫膜结构出现萎缩样改变。 ，模型组感光细胞数为（164.67±34.37），正常组为（243.33±15.23），且模型组感光细胞数明显少于模型组。为正常组，差异有统计学意义（t=-9.77，Pu003c0.05）；透射电镜显示模型组视网膜感光细胞膜盘结构松散。变形和部分破碎。视网膜色素上皮细胞数量变短，布鲁赫膜变得不规则厚，外层胶原层成层沉积，内皮细胞突入布鲁赫膜。 TUNEL结果显示，正常组几乎没有凋亡细胞，模型组视网膜色素上皮层和光感受器层出现大量凋亡细胞，光感受器凋亡率为（43±2.73） ）。 ) ，且两组间差异有统计学意义(Pu003c0.01)。免疫荧光检查结果，正常组外丛状层和神经纤维层VEGF表达呈弱阳性，除上述模型组细胞外，RPE细胞层也呈强阳性染色。正常组视网膜各层细胞未见明显CD31阳性染色，模型组RPE细胞层CD31表达强，提示RPE层有血管新生。

　　结论：长期光照结合对苯二酚饮食的小鼠与人类AMD的发病机制和特征非常接近，可为进一步研究AMD的发病机制和预防提供可靠的动物模型。