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怎么制备脂肪栓塞综合征动物模型?

  (1)复制方法刮去异体狗的骨髓,在37℃的培养箱中孵育30分钟,并以3000r/min的速度离心10分钟。上清液(骨髓脂肪)存储在-80°C的冰箱中以备后用。选择一条健康的杂种狗,体重为15-18公斤。将冷冻的骨髓脂肪在水浴中加热至37°C,然后通过脂肪股静脉以0.7 ml/kg体重的剂量缓慢注入,以引起脂肪栓塞综合征。观察时间为48小时。收集肝素抗凝性股动脉血,并在注射前(0 h)和注射后(4 h,4、12、24、48 h)注射骨髓脂肪之前和之后测量动脉血氧张力。 )以及注射后4、12、24和48小时的外周静脉血,以进行血小板计数和血小板聚集研究。栓塞后48小时处死动物,收集肺组织进行肉眼观察,冷冻切片油红O脂肪染色,石蜡切片HE染色和电子显微镜检查。脂肪栓塞后,血小板随着动脉血氧张力的降低而逐渐减少;血小板凝集率早期升高,并在24小时后显着降低;病理检查肺组织损害严重:(1)肉眼检查:显示出肺组织的充血和水肿,大量出血性梗塞,肝样变化。 ②将冷冻的肺组织用油红O染色。在肺部的小血管以及肺组织和肺泡腔之间的空间中发现了红色脂质滴。 ③石蜡组织切片,HE染色,光学显微镜检查:脂滴附着在肺泡腔和肺血管腔,肺毛细血管内皮肿胀,组织充血水肿,炎性细胞和吞噬细胞浸润。 ④电子显微镜检查:脂滴和血小板的聚集和变形,肺微血管腔,肺血管内皮细胞肿胀,基底膜增厚,II型肺泡上皮细胞增殖和变性,线粒体,溶酶体,粗糙表面在ER中看到的损坏。

  (2)模型特征脂肪栓塞综合征的实验动物模型通常使用甘油,三酰基甘油,游离脂肪酸,矿物油,橄榄油和同源动物组织脂肪来静脉内使动物脂肪以多种方式重复。栓塞综合征。缺点是很难真正模拟临床脂肪栓塞综合征的病因,因为大多数栓塞是化学合成剂,并且与临床脂肪栓塞综合征的脂肪栓塞成分不同。实验结果表明,栓塞的脂肪来源于骨髓,而不是脂肪组织,乳糜微粒,游离脂肪酸等。

  (3)比较医学脂肪栓塞综合征是外伤和骨折的严重并发症。它是一种急性炎症过程,包含多种化学介质和相互促进的多种细胞成分。使用异体狗的长骨髓脂肪作为脂肪栓,建立了脂肪栓塞综合征的动物模型。动物的临床体征,验血结果,总体观察结果和组织病理学检查与临床脂肪栓塞综合征一致。诊断标准。

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