目的:靶向雷帕霉素抑制mTOR并研究其对大鼠心脏瓣膜间质细胞增殖的影响。
方法:大鼠瓣膜基质细胞的体外分离、培养和鉴定。将细胞随机分为两组:雷帕霉素组和对照组。采用MTT法检测并绘制大鼠瓣膜间质细胞生长曲线。后处理;流式细胞术检测雷帕霉素对细胞周期的影响;RT-PCR检测细胞内S6和P70 S6K mRNA表达水平;检测S6、P70S6K和P细胞内S6表达水平Western blotting和P-P70S6K蛋白.
结果:我们成功地分离培养了体外分离的大鼠瓣膜基质细胞。对照组细胞活性显着高于加药组(Pu003c0.05),药物流式细胞仪细胞活性显示加药组细胞比例无显着差异在对照组的每个循环中,显示加药组S6和P70 S6K蛋白的磷酸化水平降低(P)。 u003c0.05)。
结论:雷帕霉素可以抑制瓣膜间质细胞的增殖。原因可能是mTOR抑制后靶蛋白S6和P70S6K的磷酸化水平下调,而不是细胞周期的变化。