动物造模 中国实验动物信息网 2022-07-07 1548

　　目的 比较大鼠尾椎间盘不同切片方式及染色方法的优缺点，为相应的临床诊断及实验研究奠定理论基础。

　　方法 收集SD 大鼠尾稚间盘，制成冷冻切片及石蜡切片后，分别行苏木精-伊红染色（HE 染色）、番红-固绿染色、Masson 染色、甲苯胺蓝染色，以及针对一型胶原蛋白（typeIcollagen，COL-I）、二型胶原蛋白（type Ⅱ collagen，COL-ⅡI）和糖胺聚糖（glycosaminoglycan，GAG）的免疫荧光染色，对比观察椎间盘各层组织形态及蛋白表达的情况。

　　结果 在染色方法中，石蜡切片HE 染色能清晰显示各层组织;Masson 染色能清晰显示纤维环组织及髓核组织; 番红-固绿染色及甲苯胺蓝染色能较好地显示软骨各层及软骨下骨结构。冷冻切片的免疫荧光染色中，纤维环组织的胶原蛋白多为COL-Ⅰ，髓核组织中胶原蛋白多为COL- IⅡ，而GAG 多由髓核细胞及髓核样细胞分泌。

　　结论 观察椎间盘各层组织时，选用HE 染色及Masson染色等染色，其中石蜡切片优于冷冻切片; 观察椎间盘各种蛋白的表达及分布时，选用免疫荧光染色，其中冷冻切片优于石蜡切片。