动物造模 中国实验动物信息网 2022-05-07 721

　　目的 获取树鼬连接黏附分子A的全长编码序列并进行分子特征分析，探讨JAM-A作为呼肠孤病毒受体入侵树晌原代肺细胞的作用机制。

　　方法 提取健康树鼬组织总RNA，采用反转录PCR和cDNA末端快速克隆技术获取JAM-4基因; Unipro UGENE分析编码氨基酸，使用MEGA6.0软件*大似然法构建系统发育树;实时荧光定量PCR检测JAM-A在树剿25个组织和血液中的表达分布情况;于树购原代肺上皮细胞上进行受体的特异性抗体阻断处理，然后采用免疫荧光法观察病毒抗原对呼肠孤病毒感染的影响。

　　结果 获取了JAM-A基因cDNA全长序列，2962bp;系统发育树进化分析显示JAM-4基因与人的亲缘关系较啮齿类更近;JAM-A分子广泛表达于树剿的外周组织，而在呼吸道和消化道表达水平更高。特异性抗体作用于细胞显著降低病毒抗原的免疫荧光积分吸光度值（P<0.0001）。

　　结论 首次克隆并分析了JAM-A的基因序列，验证JAM-A分子是呼肠孤病毒入侵树删的主要受体，提示树晌可作为一种新的呼肠孤病毒动物模型。