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【动物造模】-小鼠循环肝癌细胞模型的建立与评价

  目的:利用小鼠肝癌Hepa1-6细胞建立小鼠肝癌循环肿瘤细胞模型

  方法:使用108只雄性C57BL/6只小鼠,按体重分为3组,每组36只。三组中的每组均在每条尾静脉中分别接种0.2 mL小鼠肝癌Hepa1-6细胞单细胞悬液,其浓度为1 x 106、5 x 106和1 x 107细胞/ mL。接种后第1、5、9、13、17和21天对每组进行测试并抽血。流式细胞仪用于记录20,000个有核细胞中CTC的数量和百分比,以及它们的相对CTC抑制率和动物死亡率。 (2)将80只雄性C57BL/6小鼠按体重分为两组,分别为模型对照组和甲苯磺酸索拉非尼组,每组饲养40只小鼠。尾静脉分别接种0.2 mL浓度为5×106细胞/ mL的Hepa1-6细胞单细胞悬液,接种后第二天连续接种21倍索拉贝托磺酸盐(50 mg/kg)被管理在给药的第3、8、15和21天收集血液用于CTC检测。

  结果:(1)以1×106个细胞/ mL的浓度接种细胞悬液后,头1、5、9、13、17和21天的动物CTC比例分别为25.1%,18.1% ,分别为8.9%,4.4%,2.9%,0.3%,没有动物死亡;接种浓度为5 x 106细胞/ mL的细胞悬液后,动物CTC的前1、5、9、13%。第17天和第21天如下:40.4%,35.4%,15.4%,9.0%,6.6%,4.1%,无动物死亡;细胞浓度为1 x 107细胞/ mL第1天和第5天的动物百分比接种悬浮液后CTC为39.1%,33.5%,接种后立即发生动物死亡,接种后7天所有动物死亡。 (2)甲苯磺酸索拉非尼给药后循环肿瘤细胞D3、D8,D15和D21的相对清除率分别为-7.5%,4.6%,55.3%和-94.5%,与模型对照组相比有显着差异().P\u003c0.05或P\u003c0.01)。

  结论:尾部静脉内注射浓度为5×106细胞/ mL的小鼠肝细胞癌细胞Hepa1-6悬浮液可以建立小鼠肝细胞癌CTC模型,该模型可用于筛选和评估抑制循环肿瘤的药物细胞。

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