动物疾病模型,蛙或蟾蜍坐骨神经－腓肠肌标本 中国实验动物信息网 2021-03-08 1326

　　实验原理

       青蛙和蟾蜍等两栖动物具有与温血动物相同的基本生活活动和生理功能，并且可以轻松了解离体组织的生活条件。神经肌肉标本可以通过len液的渗透来维持。因此，长期以来，在生理活动中，经常在生理实验中使用青蛙或蟾蜍牛皮癣神经胃膜分离标本来观察骨骼肌的兴奋性，兴奋性过程和收缩特性。

　　实验设备

　　1套烧杯手术器械和药品：1个青蛙盘，1个小玻璃盘，1个粗剪刀，1个直形剪刀，1个大镊子，1个小镊子，眼睛1个剪刀，1个探针，2个玻璃分钟手，1个大烧杯，1个小烧杯，1个滴管，1个培养皿，棉线，len溶液，锌铜叉。

　　实验步骤

　　1、破坏大脑和脊髓：取出蟾蜍并用自来水冲洗。用左手握住蟾蜍，用食指推动头部向前弯曲头部，然后用右手握住青蛙的针穿过大孔，向前刺穿颅腔，左右搅动。破坏脑组织，将青蛙的针拉到大孔。拔出后，将尖端旋转并插入颅腔以破坏脊髓。插入椎管后，蟾蜍的后肢几乎总是失去张力并发展为尿失禁。当大脑和脊髓完全被破坏时，蟾蜍的四肢下垂，呼吸消失。

　　2.切开上肢和内脏：用粗剪刀将joint关节的脊柱切成0.5-1.0厘米的碎片。用镊子固定后脊柱，并用剪刀沿脊柱的两侧切开所有内部器官以及头部和胸部，使后肢，ac骨，后脊柱和坐骨神经靠近脊柱的两侧。

　　3.剥皮：使用镊子或用左手直接捏住脊柱残端（注意不要按压神经），用右手，后肢和皮氏培养皿捏住残端的皮肤标本放在镊子溶液中。在继续下一步之前，请洗手和用过的餐具。

　　4.分开的腿：用细的玻璃针松开脊柱两侧的两个坐骨神经，在脊柱附近绑一条细线，然后在领带和脊柱之间绑住神经。在神经上放置一条细线，在两个大腿上各放置两个坐骨神经，用左手握住脊柱，倾斜骨，并切断整个下脊柱。捏住两侧的i骨，以相反的方向分开，使耻骨联合脱臼，沿着耻骨联合的中心切开两个下肢，将一条腿浸泡在len溶液中以备后用，然后将另一条腿放在浸入的玻璃杯中盘子。上面有任氏的解决方案。

　　5.分离坐骨神经并切开股骨。识别坐骨神经沟和腓肠肌的位置，用剪刀剪开梨状肌及其周围的结缔组织，并用左手握住一条细神经。沿着右手的坐骨神经沟握住剪刀或玻璃分针。小心地除去坐骨神经，直到其脱离入lite窝。在小腿上放置一条干净的坐骨神经，沿着膝盖关节切开股骨的所有肌腱，用剪刀擦拭小腿的附着肌肉，切开股骨的上股和大腿上部的肌肉1/3、一种被称为坐骨神经的小腿标本。

　　6.自由腓肠肌：以坐骨神经的小腿标本为基础，用剪刀剪断跟腱的下端，在跟腱与肌肉的连接处打细线，并握住线。腓肠肌到膝关节。*后，用粗剪刀剪掉膝关节下的小腿，留下坐骨神经和腓肠肌的标本。准备好的标本用锌-铜叉的两极轻轻地触摸坐骨神经。腓肠肌立即收缩表明标本具有良好的兴奋性。然后将样品放在Len溶液中，等待兴奋性稳定下来。在进行实验之前。

　　注释

　　1、避免接触皮肤中毒和去皮组织中的其他杂质。

　　2.分开神经时，请务必使用玻璃分针，不要使用刀子或剪刀。

　　3.不要用力拉神经，以免损坏它们。

　　4.在样品制备过程中，应用仁溶液适当润湿样品。

　　5.请勿用手指或金属设备触摸或握持标本的神经肌肉。