疾病动物模型,急性早幼粒白血病 中国实验动物信息网 2021-03-08 1002

　　“严重的联合免疫缺陷小鼠是CB-17近交小鼠，并已在美国Bosma进行了鉴定。小鼠的第16个常染色体隐性突变（SCID）是突变小鼠1、纯合SCID小鼠基因几乎完全丧失了小鼠T和B淋巴细胞具有功能，并已广泛用于这类小鼠的免疫学和肿瘤学研究中，急性全粒细胞白血病（APL）可能会通过分化剂全反式维甲酸的作用而分化为阳性的常常是颗粒状的系统。 APL的病因尚不清楚，我们将研究APL的分化机制，建立稳定的动物模型非常重要

　　1资料和方法

　　1.1资料

　　1.1.1人白血病细胞系人急性髓前细胞从大学癌症研究所在10％牛血清（杭州四季青）RPMI-1640培养基中导入的HL-60细胞株，中南地区。（Gibco产品），5％CO2、37°C培养。

　　1.1.2“ SCID “小鼠”是3-4周大的16头雄性（购自中国科学院上海实验动物中心），将小鼠在带盖鼠标盒（符合SPF标准）的层流架中进行饲养。过滤室内空气的效率中等，而饮用水则是经过消毒的重蒸馏水，并加入少量盐。将维生素C，鸡蛋和碎屑添加到标准颗粒饲料中，并对与大鼠接触的所有物品进行灭菌。将它们分为两组，每组8只动物，每只腹膜内或静脉内直接接种5×106个细胞。 1.2方法1.2.1 1.2.1移植后的SCID小鼠在移植前未进行治疗，将处于对数生长期的HL-60细胞用于移植。每只小鼠在尾静脉或腹膜内注射5×106个细胞。 1.2.2外周血白细胞计数和分类疫苗接种前和疫苗接种后1、2、3和4周收集并测试尾静脉血。

　　1.2.3形态学观察收集外周血，用吉姆萨染色，在油镜下观察细胞形态，并根据早期未成熟，幼年中期，晚期未成熟，杆状核和小叶核每张计数200个。细胞。计算分类计数，早幼粒细胞的百分比。

　　1.2.4进行垂死动物的病理检查，进行病理检查，收集肝脏，脾脏，肾脏，骨骼，心脏，肺，肌肉，睾丸和肿瘤体，用10％甲醛固定48小时以上，石蜡切片，显微镜下检查。

　　1.2.5染色体核型分析使用标准染色体染色技术在体外培养HL-60细胞，并按照常规方法对腹部肿瘤组织细胞和SCID小鼠血细胞进行采样。将含有腹部肿瘤组织细胞和SCID小鼠血细胞以及10％胎牛血清的RPMI-1640培养基在CO2培养箱中于37°C和5％CO2饱和湿度下培养45-66小时，*终浓度为0.4 cor。是一个街区。中期细胞，然后收集细胞并进行低渗，固定，滴注，G带和显微镜检查。