非转基因iPS细胞 中国实验动物信息网 2021-09-28 1036

　　多能干细胞（Ps）是当前干细胞研究的热点和重点。它可以分化成体内的所有细胞，进而形成体内的所有组织和器官。因此，多能干细胞的研究不仅具有重要的理论意义，而且在器官再生、修复、疾病治疗等方面也具有重要的应用价值。然而，过去人们认为多能干细胞只能从人类胚胎中获得。 2007年，美国和日本的科学家用正常的人和小鼠皮肤细胞引入KLF4、OCT4、SOX2、C-MYC四个基因，将正常体细胞转化为多能干细胞，我发现我可以做到。由该基因诱导的多能干细胞称为诱导多能干细胞 (iPSCs)。

　　毫无疑问，这种类型的ips细胞在再生医学领域具有重要的应用价值，但常规的诱导方法是通过逆转录病毒或慢病毒载体携带OKSM 4因子，IPS细胞可能致癌。应用于人体细胞治疗领域。

　　为了解决这个问题，科学家们在过去几年开发了各种方法来诱导外源无因子iPS细胞的产生。这些方法包括质粒、piggyBac 转座子、蛋白质转导、mRNA 和 microRNA 转染。虽然这些方法可以在没有外源因素的情况下生产 iPS 细胞，但它们不能提供稳定可靠的高质量繁殖嵌合细胞。

　　在这项研究中，中国农业大学和美国犹他大学的研究人员成功地将八种重编程因子和可选择标记基因放入一个非整合质粒中，产生了高质量的非转基因（转基因）。 ) 我得到了 iPS。细胞。该方法在干细胞研究领域具有重要用途。

　　所谓的无转基因iPS细胞是无需外源重编程因子即可获得或维持多能性的iPS细胞。要获得这样的 iPS 细胞，对质粒的要求高于常见的经典四因子重编程方法。

　　\"该方法涉及的8个重编程因子是OCT4、SOX2、KLF4、MYC、NANOG、LIN28、NR5A2、MIR302/367。正选择标记基因为neo，负选择标记基因为tk。整合质粒为用于在重编程完成后通过负选择轻松去除质粒，“中国农业大学吴森教授解释说。

　　研究人员优化了重编程因子的组合，选择了合适的选择性标记，将两者整合到一个非整合质粒中。更重要的是，研究人员发现 pMaster12 质粒可以产生不含转基因的 iPS 细胞。这意味着细胞在 2i 培养基中生长后，可用于操纵胚胎并产生健康的后代。

　　之前的研究有没有实现过如此高效的生殖通道？吴教授说，“从来没有真正实现过。主要是以前得到的iPS细胞质量不行。

　　吴也说了这个方法。并介绍了其他方法的区别，他说，”主要是区别在于使用了更多的方法重编程因子。并且在职业中放置了八个重编程因子。这样做的一个优点是重编程效率高。另一个优点是重编程完成后可以轻松去除外来质粒（因子）。 “

　　这项研究对于解决iPS细胞的致癌性问题非常重要，对分析诱导多能干细胞的分子机制也很有帮助。据了解，中国农业大学乌森的研究团队正尝试用同样的方法从猪、羊等大型动物身上获得转基因iPS细胞。